色譜柱的保護(hù)柱多久換一次？
一、恒譜生色譜保護(hù)柱的作用
恒譜生色譜保護(hù)柱能有效攔截樣品中的雜質(zhì)、強(qiáng)保留物質(zhì)和顆粒物等，防止它們進(jìn)入色譜柱，降低色譜柱受污染的風(fēng)險，顯著延長色譜柱的使用壽命。其具有諸多優(yōu)點(diǎn)，如省去中間的連接管路和接頭螺絲，操作更省心、便捷;可提高色譜分析靈敏度和分離度;阻力小，幾乎零背壓;能大大減少柱外效應(yīng)帶來的譜帶展寬;安裝快速簡單，采用手緊式安裝;可減少流路擴(kuò)散;柱芯成本低，能進(jìn)一步延長色譜柱的使用壽命等。
二、影響恒譜生色譜保護(hù)柱更換周期的因素
(一)樣品的性質(zhì)
雜質(zhì)含量與成分：若樣品中雜質(zhì)含量高、成分復(fù)雜，保護(hù)柱負(fù)擔(dān)加重，需更頻繁更換。例如生物樣品中的蛋白質(zhì)、核酸等大分子物質(zhì)，以及環(huán)境水樣中的有機(jī)污染物和重金屬離子絡(luò)合物等，都易快速污染保護(hù)柱。
化學(xué)性質(zhì)：樣品的酸堿性、極性等化學(xué)性質(zhì)也會影響保護(hù)柱壽命。強(qiáng)酸性或強(qiáng)堿性的樣品可能與保護(hù)柱的填料發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致填料性能下降，縮短更換周期。
(二)進(jìn)樣頻率與進(jìn)樣量
進(jìn)樣次數(shù)：進(jìn)樣次數(shù)越多，保護(hù)柱攔截的雜質(zhì)越多，填料的吸附位點(diǎn)逐漸被占據(jù)，過濾效果會逐漸降低。當(dāng)進(jìn)樣達(dá)到一定次數(shù)后，即使樣品相對清潔，也可能需要更換保護(hù)柱。
進(jìn)樣量：進(jìn)樣量過大，會使更多雜質(zhì)進(jìn)入保護(hù)柱，加速其污染。因此，在保證分析靈敏度的前提下，應(yīng)盡量控制進(jìn)樣量。
(三)流動相組成
有機(jī)溶劑比例：流動相中有機(jī)溶劑比例較高時，可能會溶解保護(hù)柱中的填料或使其膨脹，影響保護(hù)柱性能和壽命。
緩沖鹽濃度：使用含有高濃度緩沖鹽的流動相時，緩沖鹽可能在保護(hù)柱內(nèi)析出結(jié)晶，堵塞填料孔隙，導(dǎo)致柱壓升高，此時需要及時更換保護(hù)柱。
(四)分析方法與條件
分離模式：不同的色譜分離模式對保護(hù)柱的要求和損耗程度不同。例如，在正相色譜中，樣品和流動相的極性較強(qiáng)，可能對保護(hù)柱的填料產(chǎn)生較大影響;而在反相色譜中，有機(jī)溶劑的使用可能導(dǎo)致填料的溶脹和流失。
流速與壓力：高流速和高壓力會使保護(hù)柱內(nèi)的填料受到更大的沖擊力，容易導(dǎo)致填料的破碎和流失，從而縮短保護(hù)柱的使用壽命。
三、恒譜生色譜保護(hù)柱更換的判斷方法
柱效監(jiān)測：定期測定色譜柱的柱效，如理論塔板數(shù)、峰對稱性、分離度等參數(shù)。如果發(fā)現(xiàn)柱效明顯下降，且排除了色譜柱本身的問題，很可能是保護(hù)柱需要更換了。
壓力變化：觀察系統(tǒng)壓力的變化，如果在其他條件不變的情況下，壓力逐漸升高，可能是保護(hù)柱堵塞或填料壓實(shí)導(dǎo)致的，需要考慮更換保護(hù)柱。
峰形變化：當(dāng)峰形變寬、拖尾、前傾或出現(xiàn)異常峰時，除了色譜柱本身的原因外，保護(hù)柱的污染或損壞也可能是導(dǎo)致峰形變化的因素之一，可作為判斷保護(hù)柱是否需要更換的依據(jù)之一。
四、保護(hù)柱一般更換周期建議
在常規(guī)的高效液相色譜分析中，如果樣品相對清潔，進(jìn)樣量和進(jìn)樣次數(shù)適中，流動相組成合理，分析條件溫和，恒譜生色譜保護(hù)柱一般可以使用 3-6 個月左右。但如果樣品復(fù)雜、進(jìn)樣頻繁或分析條件較為苛刻，則可能需要 1-3 個月更換一次。在實(shí)際使用中，應(yīng)根據(jù)具體的分析情況和上述判斷方法，靈活確定保護(hù)柱的更換周期。
發(fā)布于: 2025-01-04